制備大腸桿菌菌懸液的步驟是什么?
發(fā)布時間:2019-06-13 07:50
編輯:創(chuàng)大鋼鐵
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先把菌液稀釋一定濃度后再用細(xì)胞計數(shù)板來確定菌濃度實驗原理:當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的
先把菌液稀釋一定濃度后再用細(xì)胞計數(shù)板來確定菌濃度實驗原理:當(dāng)待測細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細(xì)胞懸液中細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目。具體操作:1. 將計數(shù)板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計數(shù)板。2. 將細(xì)胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。3. 計算板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的。然后按公式計算:細(xì)胞數(shù)/mL=四大格細(xì)胞總數(shù)/4×104說明:公式中除以4,因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3(注意:鏡下偶見有兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個細(xì)胞計算,若細(xì)胞團(tuán)10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液)
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